ИФА (иммуноферментный анализ) — иммуноферментный анализ, которые относится к одним из наиболее часто используемых тестов в медико-биологических исследованиях для научных и диагностических целей. Он используется для обнаружения специфических белков в тестируемом материале с использованием поликлональных или моноклональных антител, конъюгированных с соответствующим ферментом.
Для проведения анализа используется специальное оборудование — иммуноферментные анализаторы Интермедика, к примеру.
В базовом варианте теста ELISA определенное количество антигена иммобилизуется на поверхности твердой фазы. Тест начинается с введения биологического материала (обычно сыворотки или плазмы), в котором будет проверяться наличие антител, специфичных к иммобилизованному антигену. Иммобилизованный антиген и его специфические антитела, если они присутствуют в биологическом материале, образуют иммунный комплекс, благодаря которому антитело становится постоянно связанным с субстратом. После промывки реакционной среды добавляется так называемый конъюгат, то есть антитело (направленное против человеческих антител), связанное ковалентной связью.с ферментом.
После повторной промывки реакционной среды и добавления соответствующего субстрата фермент, содержащийся в конъюгате, катализирует реакцию, продукт которой (чаще всего окрашенный) можно количественно определить спектрофотометрическим методом для измерения интенсивности цвета. Уровень интенсивности окраски, в зависимости от концентрации продукта ферментативной реакции, пропорционален концентрации антител в образце. Параллельно с тестируемыми образцами аналогичные этапы реакции проводятся для калибровочных сывороток (так называемых калибраторов) с известной концентрацией тестируемого антитела.
Результаты, полученные для калибраторов, позволяют построить калибровочную кривую, которая представляет собой график зависимости интенсивности цвета от концентрации антител в образце. По уравнению калибровочной кривой рассчитывается концентрация антител в тестируемых образцах. Однако следует помнить о том, что приведенное выше описание работы метода значительно упрощено и может быть подвергнуто множеству модификаций.
Иммуноферментные анализаторы
Медицинский иммуноферментный анализатор — это устройство, которое используется для выполнения тестов ELISA. Тесты ELISA позволяют определять белки в собранном образце. Их действие основано на специфической реакции связывания между антигеном и антителом.
Конечный результат зависит от интенсивности соответствующего цвета, что связано с присутствием меток ферментных антител. Этот тип иммуноферментного анализа особенно используется при диагностике различных типов аллергии или заболеваний. Это один из самых простых и чувствительных тестов, поэтому он нашел широкое применение в медицине.
Иммуноферментные анализаторы, доступные в настоящее время на рынке медицинских устройств, представляют собой современные диагностические системы, сочетающие в себе функции многих лабораторных устройств, таких как считыватели, шейкеры или термоинкубаторы. Такое комплексное решение идеально подходит для небольших лабораторий. Медицинское оборудование этого типа, в том числе благодаря своей точности, является основным диагностическим инструментом в лабораториях.
Загрузка...